pMD18T连一段多长的DNA，连接DNA用量及时间？转化到哪个感受态细胞中？Amp抗性平板长菌情况如何？仔细观察以上问题，考虑是否转化不成功。培养基的体积是否小于试管体积的1/5？摇菌转数是否达到250rpm，试管要斜放？是否观察过菌体生长过程（2-6小时生长情况），是否有噬菌体污染？如果转化成功，则需要考虑菌体生长环境。
