基本上就是PCR的protocol:1ml 提纯的DNA(差不多50ng)+2uM的M13 引物(引物的序列是:5-GAGGGTGGCGGCTCT-3)
+400uM dNTP+1.25U Taq 聚合酶(这是聚合酶来源:5 PRIME,Germany)。PCR的程序是:先95℃ 5 min 失活,然后进行以下程序的45个循环95℃ 1 min, 36℃ 1 min, 72℃ 4 min。
从没翻译过,不知道中文对不对,凑合看。PCR程序在我看来应该还要加72℃ 10 min的延长和4℃ 无限时间的保存。
有问题可以再问。