DNA聚合酶以及DNA连接酶都是作用于磷酸二酯键DNA聚合酶将游离的脱氧核苷酸聚合为DNA链DNA连接酶将经同一种限制酶切割的黏性末端(或平末端)连接是基因工程中的针线DNA复制时由DNA解旋酶将双链解开,以两条链为模版由DNA聚合酶将游离的脱氧核苷酸聚合为DNA链,不用DNA连接酶
dna聚合酶也是催化形成磷酸二酯键dna聚合酶是连接dna片段和单个脱氧核苷酸的磷酸二酯键的,而dna连接酶是连接两个dna片段间的磷酸二酯键的,二者的底物是不同的,这是二者的最大区别。