你需要6种抗体：CD4-标记荧光1CD25-标记荧光2CD127-标记荧光3加上标记了三种对应荧光的同型非特异抗体。先用同型非特异抗体分别染色的细胞调节阴性阈值。然后再用已知阳性（或者是对应荧光相同的珠子）的细胞调节机器的光谱代偿。然后检测染色的样本。先在点阵图设好CD4，CD25双阳性，然后再柱状图到处双阳性的看CD127的分布，得到读数 尽量选新鲜血液。
