大肠杆菌液体培养基是什么? 可以用LT培养基吗?

2025-02-16 21:14:52
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回答1:

用于大肠杆菌的液体培养基:

GYT培养基(Tung and Chow 1995)

  10%(v/v)甘油

  0.125%(m/v)酵母提取物

  0.25%(m/v)胰化蛋白胨

使用0.22um滤器过滤除菌,分装成2.5ml一份,保存于4℃。

LB(Luria-Bertani)培养基

  配制每升培养基,应在950ml去离子水中加入:

  胰化蛋白胨    10g

  酵母提取物    5g

  NaCl    10 g

摇动容器直至溶质溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。

M9培养基

配制1L培养基,应在750m1无菌去离子水(冷至50℃或50℃以下)中加入:

5×M9盐溶液    200ml

1 mol/LMgSO4    2 ml

适当碳源的20%溶液(如20%葡萄糖)  20ml

1 mol/LCaCl2    0.1 ml

灭菌的去离子水至980ml。

    如果需要,可在M9培养基中补加适当氨基酸和维生素的贮存液。

    5×M9盐溶液配制:用无离子水溶解下列盐类,终体积为1L:

    Na2HPO4·7H2O  64g

    KHPO4    15g

    NaCl    2.5g

    NH4Cl    5.0g

    分装成200ml一份,在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌15min。

    分别配制MgSO4溶液和CaCl2溶液,高压灭菌。用无菌水将5×M9盐溶液稀释至980ml后,加入MgSO4和CaCl2溶液。葡萄糖溶液在加到稀释的M9盐溶液之前,用0.22um滤器过滤除菌。当使用含有染色体上脯氨酸生物合成操纵子缺陷[△(lac-proAB)]的大肠杆菌以及互补的proAB基因在F'质粒上时,在M9基本培养基中补加下列成分:

    0.4%(m/v)葡萄糖(右旋糖)

    5mM MgSO4·7H2O

    0.01%硫胺

NZCYM培养基

配制每升培养基,在950ml去离子水中加入:

NZ胺    10g

NaCl    5g

酵母提取物    5g

酪蛋白水解物    1g

MgSO4·7H2O    2g

摇动容器直至溶质完全溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。

    在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。

    NZ胺:酪蛋白酶促水解物(ICN Biochemicals公司)。

    NZCYM、NZYM和NZM也可用BD Biscienses公司的脱水培养基。

NZYM培养基

    NZYM培养基除不含酪蛋白水解物外,其他成分与NZCYM培养基相同。

NZM培养基

    NZM培养基除不含酵母提取物外,其他成分与NZYM培养基相同。

SOB培养基

配制每升培养基,在950ml去离子水中加入:

胰化蛋白胨    20g

酵母提取物    5g

NaCl    0.5 g

摇动容器使溶质完全溶解。加10ml 250mmol/L KCl溶液(将1.86g KCl用100ml去离子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液)。用5mol/L NaOH调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15 psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。该溶液在使用前,加入5ml灭菌的2 mol/l MgCl2[2mol/L MgCl2溶液的配制方法如下:用90ml去离子水溶解19g MgCl2,用去离子水调整体积为100ml,在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min]。

SOC培养基

SOC培养基除含有20mmol/L葡萄糖外,其他成分与SOB培养基相同。SOB培养基经高压灭菌后冷至60℃或60℃以下,加20ml除菌的1mol/L葡萄糖溶液(1mol/l葡萄糖溶液的配制方法是:用90ml去离子水溶解18g葡萄糖,完全溶解后,用去离子水定容至100ml,用0.22um滤器过滤除菌)。

Terrific肉汤(又称TB培养基,Tartof and Hobbs 1987)

配制每升培养基,在900ml去离子水中加入:

胰化蛋白胨    12g

酵母提取物    24g

甘油    4ml

摇动容器使溶质完全溶解。然后在15psi(1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。当溶液冷至60℃或60℃以下时加入100ml无菌的0.17mol/L KH2PO4,0.72mol/L K2HPO4溶液[该溶液的配制方法是:用90ml去离子水溶解2.31g KH2PO4和12.54g K2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至100ml并在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。

2×YT培养基

配制每升培养基,在900ml去离子水中加入:

胰化蛋白胨    16g

酵母提取物    10g

NaCl    5g

摇动容器直至溶质溶解,用5N NaOH调pH值至7.0,用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。

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