小片段DNA(100-200bp)的PCR扩增

2024-11-16 11:51:14
推荐回答(2个)
回答1:

这个,出现非特异性扩增估计跟模板,引物,以至于反应条件都有关系。
可以减少延伸时间,因为你扩的片段很小,没有必要花很长时间延伸。
我P SSR的程序是94度 35s
55度 35s
72度 45s
前面的预变性和最后的延伸时间都可以随便定,没有严格要求。
如果还不行的话,你可以把模板或者引物换一换,看看有没有效果。

回答2:

出现非特异带很正常,主要是引物的特异性不好。提高退火温度,72度20秒就足够了。如果还是有非物异带的话就只能换引物位点了